| 培养基 | BEGM完全培养基+100ng/ml霍乱毒素 |
|---|---|
| 传代方法 | 复苏步骤：①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏；③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；④放入培养箱中，过夜换液，7-10 天长满。 传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察， 期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约 0.5mL，移至培养箱消化，约 2min 取出。传代用 6mL 含 10%FBS 培养 液终止消化，1000rpm 3min 离心后可 1:2 传代；冻存则用 3mL 无血清细胞冻存液重悬细胞，吹打均匀，分为 3 支冻存管，用程序降温 盒于-80℃冻存。 |
| 生长条件 | 37℃；5%CO2+95%空气； |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 存储条件 | 液氮 |
| 类型 | |
| 安全等级 | 1 |
| 分离基物 |