| 培养基 | 90%DMEM-H+10%FBS |
|---|---|
| 传代方法 | 1.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm(11200g)离心1min，倒尽上清，加200μL缓冲液GA，振荡至彻底悬浮； 2.加入20μL Proteinase K溶液，混匀； 3.加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠； 4.加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀15sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠； 5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm(13400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中； 6.向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(13,400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 7.向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm(13400g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 8.重复操作步骤7； 9.将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm(13,400g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液； 10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μL洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12000rpm(13400g)离心2min，将溶液收集到离心管中； |
| 生长条件 | 37℃；5%CO2+95%空气； |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 存储条件 | 液氮 |
| 类型 | 甲状腺癌细胞 |
| 安全等级 | 1 |
| 分离基物 |