小鼠髓样单核白血病细胞(WEHI-3B)

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小鼠髓样单核白血病细胞(WEHI-3B):小而圆的单细胞贴壁生长,部分悬浮生长

培养基90%RPMI-1640+10%FBS
传代方法复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1分钟内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9ml 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm/min离心5分钟,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱中竖立培养。 细胞传代:①离心法:收集细胞,1000rpm条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8ml培养基的T25瓶中。②半量换液法:培养瓶静置5-10分钟后,将上清培养基轻轻吸走一半,剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀,细胞悬液按1:2的比例分到新的含8ml培养基的T25瓶中。③注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到大于2×106个/ml时,重复传代操作或者冻存。
生长条件培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气;
生长特征悬浮液(一些贴壁细胞)
存储条件液氮
类型
安全等级1
分离基物来源于经肿瘤诱导处理的 BALB/c 小鼠的巨噬细胞样细胞;细胞产生 IL-3。 它产生组成酶溶菌酶、白细胞介素 3 和粒细胞集落刺激活性 (CSA)。它的生长受到低至 4.0 ng/mL 浓度的 LPS 的抑制,并在较高浓度下完全阻断。硫酸葡聚糖还在 30 至 40 ug/mL 的浓度下抑制生长。溶菌酶和 CSA 的产生不被抑制或在抑制细胞生长期间实际上得到增强。细胞表面带有免疫球蛋白和补体受体。WEHI-3 系在抗体依赖性细胞介导的细胞毒系统中对绵羊红细胞或肿瘤靶标 EL-4 仅表现出较弱的效应活性。